目的

  • 理解 EP15 的精密度和正确度验证方案
  • 学习如何用电子表进行 EP15 的计算
  • 学习如何用电子表进行配对 t-检验的“正确度”计算
  • 应用 EP15 指南验证厂商精密度和正确度的声明

实验室正面临以尽可能低的成本管理质量的压力。但方法确认研究需要费用。

符合法规验证厂商性能声明要求所必需的最基本研究是什么呢？

CLSI EP15 的《精密度和正确度性能的用户验证》指南。

应用范围

EP15 用于实验室验证方法的运行性能是否与厂商声明一致。其他 CISI 文件为厂商做出精密度 (EP5-2) 和正确度 (EP9-3) 声明提供了指南。 EP15 提供了方案和数据分析，以验证厂商的重复性、实验室内精密度和正确度的声明。

术语和定义

（检测结果的）重复性

相同检测条件下，实现检测成功的相同检测结果间的一致程度。注意：正式场合用术语“批内精密度”。

重复性的条件

在短时间内，在相同实验室内，由相同操作者使用相同设备、相同方法检测相同材料，得到独立检测结果的条件实验室内精密度。即使在同一场所并使用相同设备，在规定时间、操作者、校准和试剂的情况下，精密度仍可能发生变化。注意：正式场合用术语“总精密度”。

（检测的）正确度

大量重复检测结果的平均值与一个公认参考值间的一致程度。注意：对正确度的衡量常以偏移表示。

EP15 介绍了三个方案：

  1. 基于 5 天内每天对控制样品重复检测 3 次的精密度方案；
  2. 基于检测 20 个患者标本的正确度方案；
  3. 基于至少对两个具有定值的参考物质检测的第二个正确度方案。

EP 15 精密度方案

  1. 在 5 天内，每天在一个分析批内对 2 种浓度的每个样品均重复检测 3 次。
  2. 若因质量控制程序或操作困难必须拒绝某个分析批的结果，应舍弃整批数据，补充检测一个分析批
  3. 包含平时用的每日质量控制样品。
  4. 在相同分析批内同时检测实验样品的正确度。
  5. 根据厂商为操作者提供的说明书的规定进行校准。如果厂商在声明中注明它的精密度数据来自多个校准循环，则操作者可选择在实验期间重新校准。

EP 15 正确度验证方案（患者样本）

用新方法和将被取代的方法同时检测患者样品，是确认新方法性能的常用方法。其假设是，比较方法的结果代表正确值，厂商正是在此基础上做出了正确度或偏移声明。如果新方法是之前方法或检测系统的升级，这种假设或许是对的：如果不是，则必须仔细检查厂商声明，确保实验室的比较方法和厂商所用方法性能的一致。

检测方案建议如下：

  1. 检测 20 个样品，它们的浓度应覆盖该方法的可报告范围。
  2. 与实验室常规操作相同的方式检测这些新鲜样品。
  3. 在 3~4 天内，每天用测试和比较方法在 4h 内检测 5~7 个样品
  4. 评价 QC, 确保稳定的操作条件和有效的检测结果。
  5. 检查比较数据，证实任何矛盾结果。
  6. 计算配对结果间的差值，用差值相对于比较值绘图，以图展示数据。
  7. 对这些数据进行配对 t 一检验计算，确定方法间的平均差值（偏移）及差值的标准差。
  8. 计算可信和/或验证限值，将观测偏移与厂商声明进行比较。

EP 15 正确度验证方案（标准物质）

EP15 提供了验证方法正确度的第二个做法一检测具有定值的参考物质。必须根据已知的临床方法和分析系统检测适用性仔细选择这些物质。推荐选用的物质如下：

  • 某些分析物可从美国国家标准与技术研究院 (IST) 获取认证参考物质 (certified reference material,CRM)。
  • 能力验证计戈划提供的附有指定值的参考物质。
  • 厂商提供的附有指定值的物质。
  • 来自外部质量评估 (EQA) 计划的物质。
  • 第三方供应商提供的具备由多个实验室分析得到指定值的物质。
  • 可用来配制已知浓度的标准物质。

EP15 建议至少选择 2 个物质，分别代表方法可报告范围的高决定浓度和低决定浓度。应当按照厂商指导准备物质，每分析批重复检测 2 次，持续检测 3~5 个分析批，然后计算均值、SD 和可信限值，协助验证指定值。

本章重点

EP15 方案可能成为美国实验室验证厂商精密度和正确度声明的标准做法。由于此方案是提供声明的可靠验证，因此必须正确进行计算。它的精密度计算比每天每个样品仅检测一次的简单重复性实验复杂得多。由于压缩了实验时间，因此要求每天做重复检测，转而又要求正确地综合批内方差和批间方差，以提供实验室内精密度的可靠估计。使用患者样品的正确度方案较为传统，用配对 t-检验统计和差值图。但使用具有指定值的参考样品的正确度方案，则需要一些仔细的思考和对检测不确定度概念新的理解。