将前面所提及的方法确认中所用的方法、工具，整合成一个方案。

  • 回顾了方法确认的所有方法
  • 提供了一组用于收集每个实验所需最少数据量的工作表
  • 参照此方法和使用这些工作表，计划和组织自己的方法确认研究。

方法确认流程回顾

  1. 方法确认的目的：误差评估

  2. 【法规要求】CLIA，“证明在报告患者检测结果之前，它可以得到患者检测结果的准确度、精密度和可报告范围的性能规范，并与厂商建立的性能规范具有可比性。实验室还必须验证厂商的参考范围是否适用于实验室的患者群体。”

  3. 【选择方法进行确认】选择分析方法时考虑方法因素或特性。如每个测试的成本、标本类型、标本量、检测所需时间、分析速度、设备要求、人员要求、效率、安全等。

  4. 【实验计划】方法确人的做法实质是进行一系列实验，旨在估计某些类型的分析误差。

    1. 线性实验旨在确定可报告范围

      线性或可报告范围实验：应检测至少 5 个已知值或有定值的标本，对每个标本重复检测 3 次，评估可报告范围。

    2. 重复性实验旨在估计不精密度或随机误差

      重复性实验：推荐至少对 2 个水平的控制品重复检测最少 20 次，估计方法的不精密度或随机误差。

    3. 方法比较实验旨在估计不准确度或系统误差

      方法比较实验：以新方法（检测方法）和确定方法（比较方法）检测至少 40 个患者标本，估计方法的不准确度或系统误差。

    4. 干扰和回收实验旨在估计特定恒定系统误差和比例系统误差（分析特异性）

      干扰和回收实验：通常检测脂血、溶血和高胆红素等常见干扰物，以及对某项检测和方法特异的潜在干扰物。回收实验用来检测竞争干扰物，如标本中的蛋白质和代谢产物的可能影响。

    5. 检出限实验旨在确定分析灵敏度

      检出限实验：那些检测低值具有重要临床意义的方法需要确定检出限。一般而言，需要准备一份“空白”标本和一份“配制”标本（添加了厂商声明检出限的分析物量），每份标本均重复检测 20 次。

  5. 【数据分析】汇总不同实验收集的数据（经统计计算），提供分析误差估计。

  6. 【方法性能的判断】对照质量标准（如 CLIA 能力验证标准等提供的推荐允许总误差）比较这些观测误差判断可接受性。若观测误差小于声明的允许误差限值，说明方法性能可以接受。图示工具–方法决定图–用来将性能划分为世界级（六西格玛）、优秀、良好、临界、不佳和不可接受几个等级。

  7. 【参考区间转换】判断方法性能可以接受，还应验证参考区间。

应用发表的数据

在选择和评价方法时，评审文献是很好的开始，包括科学论文和厂商的方法介绍。

  • 评估文献中的数据，可有效减少自己实验室花费在方法确认研究上的时间和精力。
  • 必须应用实验室自己的体系组织、数据分析和数据解释。
  • 文献评审过程非常关键，它绝不是简单地接受已发表的格式、数据分析和结论。

在实验室中的应用

保持良好记录是用文件证明研究条件（试剂批号、校准品批号、重新校准、预防维护程序、任何方法变化或纠正措施）的关键。

  • 确定要求检测项目的应用、方法学和性能要求。选择一个方法，具有适合应用和方法学特性，且很有可能达到要求性能。
  • 根据该检测项目和方法特性建立一个确认计划，这是保证它在实验室成功应用的关键。列出要做的实验，确定需要收集的数据量，确定应收集数据的决定浓度或分析范围，安排各个研究人员的时间以进行验证研究。
  • 准备一组工作表，规定不同实验需要收集的数据量，据此实施方法确认计划。这些工作表决定了实验计划的格式，还便于收集数据。
    • 可报告范围工作表
      • 数据列有：日期、检测者、样品号、定值或已知值、结果 1、结果 2、结果 3、均值和备注。行数取决于检测的标本数，通常为 5~10 个。还应包括与标本来源、混合标本准备、生产商和商品批号有关的信息。
    • 重复性工作表
      • 数据列有：日期、时间、检测者、控制品 1 结果、控制品 2 结果、（控制品 3 结果，若需要）及备注。行数应不少于 20。还应包括与使用控制品的生产商和批号有关的信息。注意，通常需要两个工作表，一个用于天内重复性研究，另一个用于天间研究。
    • 方法比较工作表
      • 数据列有：日期、检测者、标本号、测试结果 (y 值）、比较结果 (x 值）、差值 (y-x) 及备注。如果进行了重复检测，还需额外增加一列。行数应当为 40。
  • 每天收集数据，同时绘制比较图。一旦发现矛盾的检测值， 立刻用两个方法重复检测。尽管差值图会更清晰地显示这些矛盾，但无论何种方法或两者的使用都能达到这一目的。
  • 对不同实验收集的数据进行相应的统计计算。
  • 用医学决定图评估方法性能是否满足实验室的要求。
  • 方法确人研究形成文件。如果方法性能可以接受，将方法程序形成标准检测流程文件，并为在职培训准备教育资料。选择合适的控制品、控制规则和控制检测次数监视日常性能。