目标：

  • 方法确认研究中确定用到的不同实验
  • 将这些实验与估计误差的类型关联起来
  • 将这些实验组织成为执行该项研究的一个实用计划

聚焦在性能特性上，包括精密度、准确度、干扰、可报告范围及（某些情况下的）检出限。这些特性或许已经有了厂商（方法性能声明）或用户（发表的确认研究）的估计。仍然需要验证这些声明或发表的结果，说明方法在用户特定实验室内运行正常且可以接受。这正是方法确认研究的目的所在。

制订计划的方式

为了进行一个规范的方法确认研究，需要做如下工作：

  • 以允许误差大小的形式规定检测的质量要求，首选允许总误差。
  • 针对预期的分析误差类型选择合适的实验。
  • 收集必要的实验数据。
  • 对数据进行统计计算，估计分析误差的大小。
  • 将观测到的误差与规定的允许误差进行比较。
  • 判断观测的方法性能可否接受

可通过如下思路制订实验计划：

  • 确定评估这个项目检测和方法需要的误差类型。
  • 确定估计这些误差类型需要的相应实验和数据量。
  • 合理组织所需实验，先做时间短且容易做的实验，后做时间长和难度大的实验。

需要评估的误差类型

所有测量（检测）都存在误差！即使像体重秤这样简单的测量装置也有误差。在你用体重秤测量自己的体重时都能观察到误差，所以你会立刻从秤上下来，再站上去，重新测量一次。

如果像秤这么简单的装置都有误差，不难理解实验室检测所用的复杂设备和系统进行的测量同样存在这些误差类型。

  • 不精密度或随机误差。
  • 不准确度、偏移或系统误差，包含两种类型：
    • 恒定系统误差。
    • 比例系统误差。

我们常会尝试调整秤的零点以使称重减轻。这是假设存在一个恒定的系统误差，即所有用这台秤测量的人都偏高同样的重量。若是另一种情况，所有人称重的误差是其体重的一定比例，即比例误差，则需要通过类似校准的调整进行纠正，而不是调整零点。

重复性实验。

在特定时间段内（通常在一个分析批内、一天内或一个月内）对相同检测样品的系列分样进行一系列的检测，提供随机误差的信息。初步实验通常只确定批内不精密度；最终实验常要求不少于 20 个工作日，以提供对总不精密度的更好评估，包括批内和批间不精密度

干扰实验。

提供因方法特异性不足所致的恒定系统误差的信息。将怀疑的干扰物加入含有分析物的样品得到一个检测样品。取原始样品的第二个分样，用与干扰物等量的溶剂进行稀释得到另一个对照样品。然后用测试方法分析这两个样品，确定它们之间的差异

回收实验。

提供因竞争反应所致的比例系统误差的信息。将待测分析物的标准溶液加人一个患者标本的分样得到一个检测样品。将配置标准液溶剂等量加入相同患者标本的第二个分样，得到一个回收空白样品。然后用测试方法分析这两个样品，对回收量与加入量进行比较。

方法比较实验。

主要用于估计真实患者标本观测到的平均系统误差，也可揭示误差性质是恒定的还是比例的。收集系列患者标本，再用测试方法和比较方法进行检测。比较结果确定方法间的差异，即为方法间的分析误差。

将实验组成一个计划

熟悉期

  • 建立工作程序
  • 确认可报告范围
  • 核实校准
  • 核实检出限

方法确认初步实验

  • 进行批内重复性研究。
  • 进行干扰研究。
  • 进行回收研究
  • 判断分析的可接受性

方法确认最终实验

  • 进行总的重复性研究
  • 进行方法比较研究。
  • 判断分析的可接受性
  • 验证参考区间。
  • 整理形成文件。

实施

  • 选择 QC 程序。
  • 撰写操作规程或程序。
  • 培训检测者。
  • 将方法用于服务。
  • 监控日常性能。

方法实施始于编写方法规程或实验室程序，后者将用于培训检测者运用新方法。其中的一个必要部分是描述将用于监控目常性能的质量控制程序。一日完成对检测者的培训和方法开始日常服务，尤为重要的是在第一个月内密切监控性能、找出问题根源、改进预防维护程序，并向分析人员更新加强检测方法质量管理的措施。

总结

文章中提到了进行方法确认研究的步骤，包括理解实验、制定计划、记录数据、观察数据、做出结论、设计 QC 程序等。文章中还提到了在进行统计分析前，需要将数据以表格和图示进行观察，并在收集数据时记录实验中发现的问题。最后，文章提到了即使判定方法可以接受，工作仍未结束，下一步的实施还要求设计恰当的 QC 程序，建立标准操作程序文件，并对所有操作者进行全面的培训。

文章中提到的重点如下：

  • 进行方法确认研究需要理解实验，并将它们组成一个高效的计划。
  • 在收集数据时，将实验中发现的问题记录在工作表顶部。
  • 在进行统计分析前，数据以表格和图示进行观察。
  • 在完成每项实验之后，应当做出性能能否接受的结论。
  • 即使判定方法可以接受，工作仍未结束。
  • 下一步的实施还要求设计恰当的 QC 程序，建立标准操作程序文件，并对所有操作者进行全面的培训。